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Actualités

*A novel ex vivo* mouse aorta perfusion model** (février 2012)
	3R-Info-Bulletin 48 Présentation du projet achevé Développement d’un modèle tissulaire ex vivo pour la recherche cardiovasculaire et pour la détermination de procédures importantes sur le plan thérapeutique dans le traitement de l’artériosclérose. Prof. Patrick Hunziker, Clinique de médecine intensive de l’Hôpital universitaire de Bâle, Suisse Dans le cadre du projet, du tissu aortique de souris transgéniques (souris ApoE^-/-) a été isolé et cultivé comme explant, ce qui a permis de développer une méthode de fabrication puis d’observation en ligne au microscope fluorescent. Il a été possible d’identifier et de caractériser des plaques sclérotiques sur les parois aortiques après l’injection de marqueurs spécifiques dans l’aorte. De plus, l’évolution dans le temps des mutations cellulaires a pu être déterminée. Les résultats de l’étude correspondaient largement aux connaissances acquises lors d’essais avec des souris ApoE^-/-. Cette concordance démontre que nombre d’expériences, telle une présélection de nouveaux médicaments potentiels, peuvent être menées ex vivo. 3R-Info Bulletin 48 \| projet 111-08

Nouvel expert (janvier 2012)
	Le 17 janvier 2012, le Conseil de Fondation a nommé le Professeur Simon P. Hoerstrup, Dr. med. Dr. rer .nat., directeur du Centre suisse de médecine régénérative (SCRM) de l’Hôpital universitaire de Zurich et de l’Université de Zurich, comme membre du Comité d’expert. Comité d'experts

Nouveau membre du Conseil de Fondation (décembre 2011)
	Le 15 décembre 2011, le Conseil de Fondation a nommé Madame Nathalie Stieger, lic. oec. HSG, F. Hoffmann-La Roche SA, Bâle, comme nouveau membre au sein du Conseil de Fondation. Elle succède ainsi à Madame Silvia Matile-Steiner, qui a quitté Roche. Conseil de Fondation

Clôture d’un projet (décembre 2011)
	Modèle in vitro des infections et de la régénération du système nerveux central: cellules souches neuronales utilisées dans le traitement des lésions cérébrales et dans les thérapies régénératives en cas de méningite bactérienne Prof. Dr. med. Stephen Leib, Institut pour les maladies inféctieuses, Universié de Berne, Suisse Le projet a utilisé des coupes de tissus organotypiques de l’hippocampe issus de cultures pour étudier des mutations cellulaires dans des types de cellules qui pourraient jouer un rôle lors de lésions cérébrales et dans la régénération après une méningite bactérienne. On a réussi à différencier différents stades de cellules souches (précurseurs) neuronales dans des cultures sur plusieurs semaines. L’aptitude de ces cellules à être transplantées et leur comportement dans le tissu neuronal ont été analysés. Il a été possible de démontrer une interaction fonctionnelle entre ces cellules et les cellules des coupes de tissus de l’hippocampe. Cette méthode in vitro peut être appliquée pour d’importants examens préliminaires. Il s’ensuit que l’expérimentation animale n’est plus nécessaire que pour la dernière confirmation des résultats obtenus in vitro. projet 103-06

Nouveauté en 2012: dépôt de l’esquisse de projet en premier lieu puis de la demande (décembre 2011)
	Le Conseil de Fondation a décidé de scinder en 2012 la procédure de demande en deux étapes afin de rationnaliser l’évaluation des demandes, d’une part, et d’épargner aux requérants des dépenses pour des projets non susceptibles d’obtenir un soutien, d’autre part. Dans tous les cas, il faut d’abord déposer une esquisse de projet. Délai d’envoi : 1^er février 2012. Si le Comité d’experts estime que le projet proposé s’inscrit dans les principes des 3R, il invite le requérant à déposer une demande d’allocation avec une présentation détaillée du projet. Appel à projets \| Marche à suivre pour déposer une esquisse de projet

Méthodes 3R (novembre 2011)
	Nouveau dispositif d’apprentissage du prélèvement de sang et de l’administration de substances par voie intraveineuse aux lapins (oreille de lapin artificielle) Dr Sushila D’Souza¹, Institut Pasteur de Bruxelles, Belgique; ¹adresse actuelle: GSK Biologicals, Wavre, Belgique Prélever du sang par voie intraveineuse ou artérielle et injecter des substances au lapin en lui infligeant le moins de contrainte possible demande de l’entraînement. Cette oreille de lapin en silicone développée dernièrement permet d’apprendre à pratiquer ces gestes sans recourir à l’animal. Elle est particulièrement utile pour les cours de base obligatoires destinés aux personnes travaillant dans l’expérimentation animale. méthode M4

Le métabolisme constitue un aspect important des stratégies d’analyse de substitution aux tests sur les poissons (octobre 2011)
	3R-Info-Bulletin 47 La concentration possible de substances chimiques affichant une certaine liposolubilité et présentes en grandes quantités dans l’environnement est déterminée à l’aide de poissons. Pour obtenir ces données sans expérience sur les poissons, il faut prendre en compte dans les analyses une métabolisation potentielle car celle-ci modifie la concentration des substances dans un organisme vivant. La métabolisation a pu être démontrée avec des substances de référence sur des cellules hépatiques de poissons fraîchement isolées. La standardisation des protocoles in vitro a permis d’améliorer la pertinence des méthodes sans animaux au point que leurs résultats soient comparables aux valeurs obtenues avec les poissons. 3R-Info Bulletin 47 \| projet 108-07

Révision des Statuts de la Fondation (octobre 2011)
	Le 28 septembre 2011, l’instance de surveillance a adopté le nouveau Règlement de la Fondation ainsi que les adaptations de l’Acte de fondation que le Conseil de Fondation avait votés le 30 mars 2011. Acte de fondation \| Règlement

Publication du rapport annuel 2010 (juillet 2011)
	Le 30 mars 2011, le Conseil de Fondation a adopté le rapport annuel 2010 sur l’activité de la Fondation en 2010. Les allocations de recherche accordées se sont élevées à Fr. 728 600.00. Sept nouveaux projets ont été approuvés et trois clôtures de projet ont été acceptées. rapport annuel 2010 \| version PDF

*La virulence du parasite Toxoplasma gondii* peut être déterminée dans des cultures de cellules humaines** (mai 2011)
	3R-Info-Bulletin 46 Présentation du projet achevé Evaluation d’un modèle in vitro permettant d’identifier les paramètres de l’hôte en fonction de la virulence des souches de Toxoplasma gondii Dr Sushila D’Souza¹, Institut Pasteur de Bruxelles, Belgique; ¹adresse actuelle: GSK Biologicals, Wavre, Belgique Le Toxoplasma gondii (hôte intermédiaire: le chat) est l’agent de la toxoplasmose, qui peut également avoir des effets aigus chez l’être humain. L’infectivité des échantillons contaminés par le Toxoplasma gondii est mesurée sur des souris. Pour remplacer ces expériences très contraignantes pour les animaux, on a cultivé des parasites issus de souches de différents degrés de virulence connus conjointement avec des cellules intestinales humaines. L'infectivité était corrélée à la quantité et à l'ampleur de la formation de foyers dans la culture monocouche. On observe une corrélation inversée avec le degré d’inhibition dans les cellules intestinales de la protéine béta-defensine 2 assurant l’immunité. Ces mutations pourraient servir d’indicateurs pour déterminer l’infectivité de Toxoplasma gondii sans expérimentation animale. 3R-Info Bulletin 46 \| projet 107-07

Nouveau membre du Conseil de Fondation (avril 2011)
	Le 30 mars 2011, le Conseil de Fondation a désigné les organes de la Fondation pour les quatre années à venir et nommé à cette occasion Monsieur Markus Schmutz, dr sc. nat., collaborateur de Novartis Pharma SA, Bâle, comme nouveau membre au sein du Conseil de Fondation. M. Schmutz succède ainsi au Prof. Paul Herrling, qui quitte ses fonctions pour des raisons d‘âge. Conseil de Fondation

Nouveau projet (avril 2011)
	Développement et validation d’un modèle d’analyse des cellules sanguines myélo�des Dr Charaf Benarafa, Institut Theodor Kocher, Université de Berne, Berne, Suisse Les granulocytes neutrophiles jouent un rôle important dans les maladies inflammatoires et dans le rejet des agents pathogènes mais ils ne se trouvent qu’en faible quantité dans le sang. C’est pourquoi, afin d’analyser leur fonction, on utilise de nombreuses souris, également celles issues de souches transgéniques. Or, grâce à une manipulation génétique (Hoxb8) des précurseurs des neutrophiles, on tente d’obtenir des granulocytes neutrophiles fonctionnels. Ces cellules doivent être caractérisées afin d’être sûr qu’elles se comportent comme des cellules différenciées. Ainsi, il serait possible de renoncer à un grand nombre de souris et de réduire le nombre de souches de souris détenues. projet 126-11

Nouveau projet (avril 2011)
	Liposomes utilisés comme substituts fonctionnels de cellules nerveuses pour la détermination de la puissance des toxines agissant à différents niveaux comme p. ex. la neurotoxine botulique (BoNT). Oliver G. Weingart, biol. dipl., Institut des sciences des denrées alimentaires, Alimentation et santé, EPF Zurich, Suisse Les autorités d’autorisation exigent pour chaque lot de toxines produites à partir d’organismes vivants et autorisées pour des indications médicales la détermination de leur efficacité (puissance). Cette détermination de la puissance est généralement effectuée sur la souris à l’aide du test LD50 très contraignant pour l’animal. A la place, il est possible d’utiliser en partie des systèmes cellulaires. Mais ceux-ci affichent souvent une sensibilité et une reproductibilité trop faibles. Or, en intégrant les fragments de la chaîne d’action d’une toxine déterminée dans des liposomes, il devrait être possible de combler les lacunes des systèmes cellulaires. L’analyse de la puissance pourrait alors être effectuée sans recours au test LD50 sur la souris. projet 125-11

Clôture d’un projet (mars 2011)
	Recours à l’IRM (imagerie par résonance magnétique) pour caractériser les inflammations et les modifications de la fonction pulmonaire chez le rat Dr Nicolau Beckmann, privat-docent, Novartis Pharma SA, Novartis Institute of Biomedical Research, Bâle, Suisse Les caractéristiques du déroulement de modifications inflammatoires et fibreuses induites (stades précoces de l’asthme) ont été définies à l’aide de l’IRM (imagerie par résonance magnétique) sur le rat pour le développement de médicaments anti-asthmatiques. Contrairement à la mesure conventionnelle de la fonction pulmonaire et aux analyses histopathologiques définitives, cette méthode non invasive a permis non seulement de réduire le nombre d’animaux d’expérimentation de 90% mais encore de suivre à chaque instant l’état de santé individuel de chaque animal utilisé. Cela est déterminant pour le bien-être des animaux, du fait que – au cas où le médicament testé ne montrerait aucun effet – les animaux peuvent être retirés de l’expérience dès les stades précoces de l’asthme. projet 82-02 \| extended abstract

Clôture d’un projet (mars 2011)
	Modèles non mammifères pour l’analyse des processus intervenant dans l’infection bactérienne (réseau NEMO) Prof. Pierre Cosson, CMU, Faculté de Médecine, Département de Physiologie Cellulaire et Métabolisme, Genève, Suisse Les mécanismes de l’infection bactérienne et de la stratégie immunitaire cellulaire peuvent également être étudiés sur des amibes et des mouches des fruits (drosophiles). Sachant cela, on pourrait mener certaines expériences relatives aux infections sur des amibes et des mouches des fruits au lieu d’animaux d’expérimentation. Pour promouvoir ce changement, on a créé et financé une plateforme pour 5 groupes de travail pendant 3 ans sur le site Internet de la Fondation Recherches 3R. L’espoir existe de voir d’autres chercheurs appliquer les modèles disponibles avec les amibes et les mouches des fruits pour le screening d’antibiotiques potentiels et réduire ainsi les expériences usuelles relatives aux infections sur les mammifères. projet 99-05

Clôture d’un projet (mars 2011)
	Cultures de coupes organotypiques du SNC utilisées comme modèle in vitro pour l’analyse des dommages causés au tissu immunitaire et de la réparation des tissus en cas de sclérose en plaques Prof. Dr med. Norbert Goebels¹, neuro-immunologie, Clinique neurologique, Hôpital universitaire de Zurich, Suisse; ¹adresse actuelle: Université Heinrich-Heine Düsseldorf, Département de neurobiologie, Allemagne. Les processus menant aux lésions causées par la sclérose en plaques sont souvent étudiés sur un modèle animal (modèle de souris EAE). Le projet a analysé les mécanismes immunologiques des lésions cérébrales sur des coupes de tissu cérébral de culture de souris transgéniques à titre de substitution partielle au modèle animal. Il a pu être démontré que les anticorps et le système complémentaire conduisent à une démyélinisation des axones sans pour autant les léser. Toutefois, les cellules T cytotoxiques (CD8) spécifiques des antigènes provoquent une lésion des axones au sens d’un dommage collatéral, mais seulement après une préactivation du tissu et des cellules T cytotoxiques. Ce type de lésion n’a pas pu être établi jusqu’alors avec le modèle animal EAE. Cela pourrait mener à une réduction de l’acceptation du modèle animal et, par là, des expériences EAE contraignantes pour les animaux. projet 101-06

Clôture d’un projet (mars 2011)
	Evaluation de fractions lipidiques comme substitut au sérum fœtal de veaux dans des cultures cellulaires Prof. Dr Paul Honegger, Département de Physiologie, Université de Lausanne, Suisse Les cultures cellulaires nécessitent la plupart du temps des solutions nutritives à base de sérum fœtal de veau afin d’atteindre une croissance optimale et d’assurer le maintien des fonctions cellulaires. Du fait que la composition du sérum n’est pas définie, qu’elle varie d’un lot à l’autre et que l’obtention du sérum à partir de veaux non nés devrait être évitée pour des motifs de protection des animaux, on recherche depuis longtemps un substitut défini au sérum. Le projet a apporté la preuve inattendue qu’une protéine macromoléculaire était responsable de la stabilisation des fonctions cellulaires dans la fraction lipoprotéique. Les résultats et les liens de causalité sont décrits exhaustivement dans le descriptif élargi et synthétisés dans le Bulletin 45. projet 109-08 \| 3R-Info Bulletin 45

Clôture d’un projet (mars 2011)
	Mise au point d’un test in vitro de screening des médicaments contre la schistosomiase [bilharziose] Prof. Dr Jennifer Keiser, Institut Tropical et de Santé Publique Suisse, Université de Bâle, Suisse La lutte contre le parasite Schistosoma à l’origine de la bilharziose peut être engagée chez l’être humain dans les schistosomes jeunes (dans le sang) ou adultes (dans les organes). Actuellement, les schistosomes sont obtenus à partir de souris et de hamsters et l’évaluation de l’efficacité est effectuée sur des souris infectées par des parasites. Contrairement aux stades adultes, il est possible de cultiver les jeunes stades in vitro. Les analyses ont montré que les substances non efficaces aux jeunes stades n’étaient pas non plus efficaces aux stades adultes dans l’expérimentation animale. Grâce à l’analyse in vitro améliorée, les expériences subséquentes sur les animaux s’avèrent ainsi inutiles. projet 110-08

Clôture d’un projet (mars 2011)
	Réduction du nombre de poissons et de leurs contraintes pour les analyses de la toxicité aiguë de substances potentiellement toxiques pour l’environnement (Directive OCDE 203) Dr Hans Rufli, ecotoxsolutions, Bâle, Suisse Le projet a permis d’émettre des propositions concrètes sur la manière d’améliorer le test sur le poisson dans le cadre des analyses de substances potentiellement toxiques pour l’environnement (directive OCDE 203) au sens des 3R. L’analyse rétrospective de centaines de données de tests sur des poissons et d’une simulation mathématique a démontré que 14% des animaux pourraient être épargnés par groupe de test sans perte de qualité. Une réduction additionnelle du nombre de poissons peut être atteinte si on utilise le test sur l’embryon de poisson pour déterminer la dose initiale. Les résultats ont été débattus et acceptés par des experts choisis d’Europe et des Etats-Unis. Les poissons subissant le degré de contrainte 3 avec la plus haute dose revendiquée (avec effet), on souhaiterait qu’un Etat membre de l’OCDE, la Suisse par exemple, soumette une proposition visant à modifier les directives de l’OCDE à l’échelle mondiale. Les résultats ont été synthétisés dans le Bulletin 43. projet 114-08 \| 3R-Info Bulletin 43

Solutions nutritives non sériques définies pour cultures cellulaires, un problème loin d’être résolu (février 2011)
	3R-Info-Bulletin 45 Les méthodes de cultures cellulaires permettent de réduire, voire de remplacer totalement, les expériences sur animaux dans la recherche biologique et les applications industrielles. Pour favoriser une croissance optimale et maintenir les fonctions cellulaires, il faut ajouter du sérum fœtal de veaux à la plupart des solutions nutritives. Or, la composition du sérum n’est pas définie et varie de lot en lot. Le but est d’éviter, pour des raisons de protection des animaux, de se procurer du sérum à partir de veaux non nés. C’est pourquoi on recherche depuis longtemps un substitut défini au sérum. L’identification de facteurs macromoléculaires dans la fraction exempte de protéines lipidiques du sérum fœtal de veaux, telle que décrite dans le Bulletin, pourrait constituer un premier pas dans cette direction. 3R-Info Bulletin 45 \| projet 109-08